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HEK-293T細(xi)胞簡介
HEK-
293T
細(xi)胞簡介
HEK-
293T細(xi)胞
極少(shao)表達(da)細(xi)胞外(wai)配(pei)體(ti)所需的內(nei)生(sheng)受體(ti),且(qie)比(bi)較(jiao)容(rong)易轉染(ran),是(shi)壹個(ge)很(hen)常(chang)用的表達(da)研(yan)究外(wai)源基(ji)因的細(xi)胞株。293細(xi)胞的壹個(ge)衍(yan)生株(zhu):293T/17的轉染(ran)效率更(geng)高,成(cheng)為廣大研(yan)究(jiu)者(zhe)研究基(ji)因功(gong)能的壹個(ge)強(qiang)大工(gong)具。
HEK-293T細(xi)胞的缺陷(xian)是(shi)生長(chang)過程中(zhong)貼壁強(qiang)度(du)比(bi)較(jiao)小(xiao)。所以(yi)在(zai)實(shi)驗過程中(zhong)容(rong)易流(liu)失(shi),從而(er)影(ying)響(xiang)實(shi)驗結(jie)果。如(ru)果壹個(ge)實(shi)驗室(shi)新(xin)得到的293細(xi)胞是(shi)郵寄(ji)得到的並(bing)且(qie)細(xi)胞在(zai)培養瓶中(zhong),就需要(yao)讓(rang)細(xi)胞沈降幾天時(shi)間,因為大量細(xi)胞會(hui)漂(piao)浮(fu)在(zai)培養液裏(li)。
來(lai)源:人體腎(shen)臟 形(xing)態(tai):上(shang)皮(pi)細(xi)胞 生長特性:貼壁 註釋:該細(xi)胞含(han)腺(xian)病(bing)毒5 DNA 。
培養液: MEM( 含(han) 2 mM L-谷(gu)氨酰胺 和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非必(bi)需氨基(ji)酸(suan), 1.0 mM 丙酮酸(suan)鈉(na)), 10% 馬血(xue)清(熱(re)滅活)。
傳代: 吸(xi)去培養液。 用0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗壹(yi)次(ci),以去(qu)除(chu)血(xue)清(血(xue)清會(hui)抑(yi)制(zhi)胰酶(mei)的活性(xing))。 加2-3毫升Trypsin-EDTA,放(fang)在(zai)37℃培養箱內(nei)約(yue)5分鐘,直(zhi)到(dao)細(xi)胞全部(bu)脫(tuo)落。 加6-8毫升培養液,用移液(ye)器把(ba)細(xi)胞吹(chui)散(san)。 加適量的細(xi)胞到新(xin)的培養器皿中(zhong)。(以1:2到1:4為宜(yi),傳代期(qi)間培養液2-3天更(geng)換(huan)1次(ci))
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