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化學合成(cheng)多肽(tai)的(de)反(fan)應(ying)原(yuan)理
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多肽(tai)合成(cheng)
儀(yi)以固(gu)相(xiang)合成(cheng)為(wei)反應(ying)原(yuan)理,在密(mi)閉的(de)防(fang)爆玻璃反應(ying)器(qi)中使(shi)氨(an)基(ji)酸按照(zhao)已知(zhi)順(shun)序(xu)(序(xu)列,壹(yi)般(ban)從C端(duan)-羧(suo)基端(duan) 向 N端(duan)-氨(an)基(ji)端(duan))不斷(duan)添(tian)加(jia)、反應(ying)、合成(cheng),(化學合成(cheng)多肽(tai))操作(zuo)*終得(de)到多肽(tai)載體(ti)。固(gu)相(xiang)合成(cheng)法(fa),大(da)大的(de)減(jian)輕(qing)了每(mei)步產(chan)品提(ti)純的(de)難(nan)度。為(wei)了防(fang)止副(fu)反應(ying)的(de)發(fa)生,參(can)加(jia)反應(ying)的(de)氨(an)基(ji)酸的(de)側(ce)鏈(lian)都是保護的(de)。羧(suo)基端(duan)是遊離(li)的(de),並(bing)且(qie)在反(fan)應(ying)之前(qian)必(bi)須活化。固(gu)相(xiang)合成(cheng)方法(fa)有兩種(zhong),即(ji)Fmoc和tBoc。由於(yu)Fmoc比tBoc存(cun)在很(hen)多(duo)優勢,現在大(da)多(duo)采用Fmoc法(fa)合成(cheng),但對(dui)於(yu)某些(xie)短(duan)肽(tai),tBoc因(yin)其(qi)產率(lv)高(gao)的(de)優勢仍(reng)然被很(hen)多(duo)企業(ye)所(suo)采用。
具(ju)體(ti)合成(cheng)由下(xia)列(lie)幾(ji)個(ge)循(xun)環組成(cheng):
1) 去保護:Fmoc保護的(de)柱(zhu)子和(he)單體(ti)必須用壹種(zhong)堿(jian)性(xing)溶(rong)劑(ji)(piperidine)去 除(chu)氨(an)基(ji)的(de)保護基(ji)團。
2) 激(ji)活(huo)和交(jiao)聯:下(xia)壹(yi)個(ge)氨(an)基(ji)酸的(de)羧(suo)基被壹種(zhong)活(huo)化劑(ji)所(suo)活化。活(huo)化的(de)單(dan)體(ti)與遊(you)離(li)的(de)氨(an)基(ji)反應(ying)交(jiao)聯,形(xing)成(cheng)肽(tai)鍵(jian)。在此(ci)步(bu)驟使(shi)用大量(liang)的(de)超(chao)濃度試(shi)劑(ji)驅使(shi)反(fan)應(ying)完成(cheng)。循(xun)環:這(zhe)兩(liang)步(bu)反應(ying)反(fan)復(fu)循(xun)環直到合成(cheng)完成(cheng)。
3) 洗脫(tuo)和脫(tuo)保護:(化學合成(cheng)多肽(tai))多(duo)肽(tai)從柱(zhu)上洗(xi)脫下(xia)來,其(qi)保護基(ji)團被壹種(zhong)脫(tuo)保護劑(ji)(TFA) 洗脫(tuo)和(he)脫保護。
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