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        1. 新(xin)聞(wen)

          人(ren)臍靜(jing)脈血管內皮(pi)細胞簡單介(jie)紹(shao)

          人(ren)臍(qi)靜(jing)脈血管內皮(pi)細胞簡單介(jie)紹(shao)
            人(ren)臍(qi)靜(jing)脈血管內皮(pi)細胞(英(ying)Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)在進(jin)行血管內皮(pi)細胞實驗(yan)時,通常選用的(de)細(xi)胞模型(xing)為(wei)人臍(qi)靜(jing)脈血管內皮(pi)細胞(Human umbilical vein endothelial cells,簡稱HUVECs)。而不是直接采用(yong)靜(jing)脈血管內皮(pi)細胞或動脈血管內皮(pi)細胞。原因(yin)是臍(qi)靜(jing)脈內皮(pi)細胞具(ju)有幹(gan)細(xi)胞的潛(qian)能,理論(lun)上可(ke)以傳代(dai)50-60次(ci)。
          細(xi)胞復蘇
            從液氮(dan)中取出細(xi)胞凍(dong)存管(guan),迅速(su)放(fang)入(ru)37℃水(shui)浴中解(jie)凍(dong)至管(guan)內(nei)殘(can)留壹點(dian)冰(bing)屑。用75%酒(jiu)精擦拭(shi)凍(dong)存管(guan)後,將(jiang)內容物吸至壹(yi)15ml無菌(jun)離(li)心(xin)管中,逐(zhu)滴加入(ru)預溫至37℃的(de)RPMI-1640培(pei)液4-5ml混(hun)勻,室溫(wen)1500rpm離(li)心(xin)10分鐘(zhong)棄(qi)上清(qing)。再用(yong)RPMI-1640培(pei)液(ye)4-5ml洗(xi)滌壹次(ci),離(li)心(xin)後棄(qi)上清(qing),加(jia)HUVEC完(wan)全(quan)培養液(ye)4-5ml備(bei)用(yong),每支HUVEC凍(dong)存管(guan)含細(xi)胞量為(wei)5×105個。
          消(xiao)化細胞
            消化液:用pH7.0-7.2的(de)PBS或D-Hank’S液(ye),分(fen)別(bie)配(pei)制(zhi)0.25%胰(yi)酶液(ye)和(he)0.02%EDTA-Na2液,用(yong)前(qian)按(an)1:1混(hun)合(he)。在細(xi)胞傳代(dai)或凍(dong)存前(qian)先(xian)消化細胞。具(ju)體操(cao)作如(ru)下:吸(xi)凈培養液(ye),每瓶加(jia)消(xiao)化液1ml,搖勻使其(qi)布(bu)滿培(pei)養瓶細(xi)胞面。37℃消化2-5分鐘。顯微鏡(jing)下(xia)看細胞回縮成圓形(xing)後(hou),輕(qing)輕震(zhen)動使絕(jue)大部細(xi)胞脫(tuo)落(luo)後,每(mei)瓶加(jia)含(han)10%FBS的RPMI-1640液(ye)的中和(he)液(ye)4-5ml中和(he)胰(yi)酶的(de)消(xiao)化作用,並(bing)用吸(xi)管(guan)輕(qing)輕吹打(da)培(pei)養面(mian)使細(xi)胞完(wan)全(quan)脫(tuo)落(luo)後,吸(xi)至15ml無菌(jun)離(li)心(xin)管內(nei)。4℃1500rpm離(li)心(xin)10分鐘(zhong)棄(qi)上清(qing),再用(yong)中和(he)液(ye)洗(xi)滌細胞,離(li)心(xin)棄(qi)上清(qing),加(jia)適(shi)量RPMI-1640液,混(hun)勻後取10ul 細胞懸液加10ul臺(tai)盼(pan)藍(lan)混(hun)勻後作(zuo)細(xi)胞計數,按(an)需(xu)要(yao)做(zuo)步驟四(si)或五(wu)。

          尊(zun)敬(jing)的(de)客(ke)戶(hu):

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