慢病(bing)毒(du)滴度快速檢(jian)測卡(病(bing)毒(du)包(bao)裝專(zhuan)用)

Catalog_no	BF06202-100
Product_name	慢病(bing)毒(du)滴度快速檢(jian)測卡(病(bing)毒(du)包(bao)裝專(zhuan)用)
Size	100個(ge)/包(bao)
Category	病(bing)毒(du)包(bao)裝試(shi)劑(ji)
Price	4220.00
應用	檢(jian)測範(fan)圍約為0-3000ng（具體以批次報(bao)告為準）

說明(ming):本(ben)類(lei)型(xing)檢(jian)測卡檢(jian)測範(fan)圍約為:0-3000ng(本檢(jian)測數(shu)據(ju)僅(jin)供參(can)考(kao)，具體產(chan)品情況請參(can)考(kao)相關(guan)批(pi)次檢(jian)測報(bao)告)

壹、原(yuan)理(li)

 

 

       本(ben)產(chan)品是基(ji)於(yu)膠體(ti)金(jin)側(ce)向層(ceng)析(xi)技術的(de)HIV-1 P24蛋白(bai)半(ban)定量檢(jian)測卡，可以(yi)用於(yu)相(xiang)關(guan)慢病(bing)毒(du)載體和假病(bing)毒(du)包(bao)裝效(xiao)率(lv)的(de)快速評估(gu)（P24蛋(dan)白(bai)是慢病(bing)毒(du)外(wai)殼(ke)中(zhong)含(han)量*大的(de)標(biao)誌(zhi)性蛋(dan)白(bai)）。檢(jian)測卡由層(ceng)析(xi)膜、樣(yang)品墊、金標(biao)墊(dian)、層(ceng)析(xi)膜、吸水紙、背板(ban)等結構組(zu)成。在(zai)層(ceng)析(xi)膜上固(gu)定有(you)羊(yang)抗(kang)鼠多(duo)克(ke)隆抗(kang)體(ti)（質(zhi)控線(xian)）和P24鼠單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)（檢(jian)測線(xian)）；在金(jin)標(biao)墊(dian)上(shang)固定有(you)膠體(ti)金(jin)標(biao)記的(de)另外(wai)壹株P24鼠單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)。待測(ce)樣(yang)品滴加(jia)到樣(yang)品墊，通(tong)過(guo)毛細作用泳(yong)向金標(biao)墊(dian)，到(dao)達金標(biao)墊(dian)後(hou)，樣(yang)品中的(de)P24蛋白(bai)與(yu)金(jin)標(biao)墊(dian)鼠抗(kang)P24單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)結合(he)形成復(fu)合(he)物(wu)。復合(he)物(wu)移動(dong)到檢(jian)測線(xian)時，被(bei)檢(jian)測線(xian)上的(de)另壹株P24鼠單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)所(suo)捕獲。隨著(zhe)被(bei)捕獲的(de)復合(he)物(wu)的(de)堆積(ji)，在(zai)檢(jian)測線(xian)上呈(cheng)現出酒紅色(se)。當復(fu)合(he)物(wu)泳動(dong)到質(zhi)控線(xian)，羊抗(kang)鼠多(duo)抗(kang)捕獲膠體(ti)金(jin)標(biao)記的(de)鼠單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)，呈(cheng)現酒紅色(se)。通(tong)過(guo)判讀層(ceng)析(xi)膜上檢(jian)測線(xian)和質(zhi)控線(xian)是否顯色(se)，判斷(duan)樣(yang)品中是否存在(zai)P24抗(kang)原(yuan)。當(dang)樣(yang)品中P24濃(nong)度變(bian)化(hua)時(shi)，檢(jian)測線(xian)顏色(se)的(de)深淺(qian)與(yu)P24濃(nong)度呈(cheng)正相關(guan)，通(tong)過(guo)與比(bi)色(se)卡比較(jiao)，可以(yi)半(ban)定量待檢(jian)標(biao)本(ben)中(zhong)P24蛋白濃(nong)度，並(bing)大(da)致(zhi)估(gu)算(suan)慢病(bing)毒(du)的(de)滴度。

 

 

 

二(er)、用途(tu)

1.基(ji)於(yu)HIV-1的(de)慢病(bing)毒(du)載體包裝效(xiao)率(lv)檢(jian)測：傳(chuan)統的(de)慢病(bing)毒(du)包(bao)裝效(xiao)率(lv)檢(jian)測的(de)方法有(you)ELISA法（檢(jian)測P24蛋(dan)白含(han)量）和Real-time PCR法（檢(jian)測核(he)酸(suan)拷(kao)貝數(shu)），這(zhe)兩(liang)種(zhong)方(fang)法都耗(hao)時費(fei)力(li)，且(qie)成本(ben)高。本(ben)產(chan)品使用簡便，檢(jian)測時(shi)間短，可以(yi)隨時(shi)對(dui)轉染(ran)效(xiao)果(guo)進(jin)行(xing)評估(gu)。如(ru)在(zai)更(geng)換(huan)培(pei)養基(ji)時(shi)，吸取樣(yang)品滴加(jia)到試(shi)紙(zhi)上，10-15min後(hou)即(ji)可判(pan)讀結果(guo)。因(yin)此(ci)，使用本(ben)快速檢(jian)測試(shi)紙(zhi)，可以(yi)快速評估(gu)轉染(ran)效(xiao)果(guo)。

2.基(ji)於(yu)HIV-1的(de)假病(bing)毒(du)包(bao)裝效(xiao)率(lv)檢(jian)測：同(tong)樣(yang)含(han)有(you)P24蛋(dan)白(bai)，在(zai)轉染(ran)後(hou)，可以(yi)使用本(ben)檢(jian)測卡對包(bao)裝效(xiao)果(guo)進(jin)行(xing)快速評估(gu)。

 

          

圖1. 檢(jian)測卡顯色(se)樣(yang)式(shi)

 

 

 

 

圖2. 比(bi)色(se)卡

 

 

 

*壹個(ge)慢病(bing)毒(du)顆粒（Lentiviral Particle, LP）中約有(you)2000個(ge)P24蛋(dan)白(bai)分(fen)子(zi)，用以(yi)下公式可以(yi)計(ji)算慢病(bing)毒(du)載體的(de)顆粒數(shu)（LP）：

壹個(ge)LP相當(dang)於(yu)：2000×24×103/(6×1023)g of P24=8×10-5 pg of P24；或(huo)者說，1ng P24=1.25×107 LPs（≈1.25×104-5 TU**）

**正常情(qing)況下，每(mei)100-1000 LPs中(zhong)會有(you)1個(ge)具有(you)感(gan)染(ran)活(huo)性(xing)的(de)病(bing)毒(du)載體，即1 TU（Transducing Unit）。

註(zhu)意：上述公式計(ji)算得到(dao)的(de)LP值是理(li)論(lun)值，檢(jian)測樣(yang)品中含(han)有(you)的(de)遊(you)離(li)的(de)P24蛋白(bai)可能(neng)會使(shi)該(gai)值偏高。 

提示(shi)：通(tong)常上(shang)清中(zhong)病(bing)毒(du)含(han)量需要超(chao)過(guo)106 TU/ml，才能(neng)確保濃(nong)縮純(chun)化(hua)後(hou)得(de)到(dao)足夠(gou)濃(nong)度的(de)慢病(bing)毒(du)載體（壹般能(neng)濃(nong)縮150倍(bei)左右）。