VK2/E6E7
Complete medium: Keratinocyte-Serum Free medium (GIBCO-BRL 17005-042)
with 0.1 ng/ml human recombinant EGF, 0.05 mg/ml bovine pituitary extract,
and additional calcium chloride 44.1 mg/L (final concentration 0.4 mM)
種屬: 人源（Homo sapiens）
組織(zhi)來源: 陰-道(dao)（Vagina）
疾(ji)病: 子宮(gong)內(nei)膜異(yi)位癥（Endometriosis）
年齡: 32 歲(sui)（32 years）
性別: 女(nv)（Female）
細胞類(lei)型: 表皮(pi)細胞（Epithelial）
生(sheng)長(chang)特(te)性: 貼壁(bi)生長(chang)（Adherent）
1. 請(qing)立(li)即(ji)檢查包(bao)裝(zhuang)袋(dai)是(shi)否有破(po)損或漏液(ye)
2. 請(qing)立即(ji)將細胞培(pei)養(yang)瓶從(cong)包(bao)裝盒中(zhong)取(qu)出(chu)，並(bing)按照下(xia)方(fang)操作步(bu)驟(zhou)進
行(xing)培(pei)養(yang)傳代
註意：如(ru)為(wei)凍存管，請(qing)收(shou)到(dao)後立(li)即(ji)解凍培(pei)養(yang)。若來不及(ji)解凍，請(qing)
儲(chu)存於液(ye)氮中(zhong)（存儲(chu)於負(fu)80度(du)，會(hui)降低(di)細胞存活率）
培(pei)養(yang)瓶中(zhong)細胞操作步(bu)驟(zhou)
對於貼壁(bi)培(pei)養(yang)的(de)細胞，寄(ji)送前(qian)，我(wo)們(men)會(hui)將運輸培(pei)養(yang)基（收(shou)到(dao) 後請(qing)使用完(wan)全(quan)培(pei)養(yang)基培(pei)養(yang)）充滿整(zheng)個(ge)培(pei)養(yang)瓶，以減(jian)少產品運輸過(guo) 程中(zhong)貼(tie)壁細胞的(de)脫落。 1. 收(shou)到(dao)細胞產(chan)品後(hou)，請(qing)註意觀(guan)察是(shi)否有汙(wu)染。將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於倒置 顯(xian)微(wei)鏡下仔細檢查是(shi)否渾濁、是(shi)否細菌汙(wu)染。因在(zai)運輸過(guo)程中(zhong)存 在顛(dian)簸(bo)，且(qie)有(you)些(xie)細胞對(dui)溫(wen)度(du)變化(hua)也(ye)很(hen)敏感，可(ke)能(neng)存在壹(yi)些細胞脫 落漂浮的(de)情況，這(zhe)些(xie)細胞仍(reng)是(shi)活細胞，請(qing)勿丟棄(qi)，可(ke)離心富集(ji)後 傳代使用。 2. 對(dui)於貼壁(bi)的(de)細胞，在(zai)生物(wu)**櫃環(huan)境(jing)中(zhong)，用真空(kong)泵去(qu)除(chu)培(pei)養(yang)瓶 中(zhong)的(de)多余(yu)培(pei)養(yang)基，至剩(sheng)余(yu)5-8mL左(zuo)右(you)，隨後將細胞置於含(han)有5%CO 的(de)37℃恒(heng)溫(wen) 培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)，擰松瓶(ping)蓋(gai)。如果(guo)細胞已(yi)經長(chang)滿(man)培(pei)養(yang)瓶 請立(li)即(ji)傳代。 3. 對(dui)於懸浮的(de)細胞，在(zai)生物(wu)**櫃環(huan)境(jing)中(zhong)，轉(zhuan)移培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)細胞 至(zhi)離心管中(zhong)，離心200×g / 5 - 10 min，去除(chu)上(shang)清(qing)後，用5 mL培(pei)養(yang)基 吹(chui)散細胞，轉(zhuan)移至(zhi)新的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，隨後置於含(han)有5% CO 的(de)37℃恒(heng) 溫(wen)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。
